近日，我校法醫(yī)學(xué)院嚴(yán)江偉教授團(tuán)隊(duì)在國(guó)際分析化學(xué)領(lǐng)域頂級(jí)期刊《Sensors and Actuators B: Chemical》上發(fā)表了題為“Multiplex isothermal amplification-based immunochromatographic biosensor enhancing genuine-signal and suppressing pseudo-signal for on-site forensic test”的研究成果。

基于團(tuán)隊(duì)以往等溫?cái)U(kuò)增結(jié)合磷酸鹽介導(dǎo)比色及側(cè)向流層析的研究（相關(guān)成果已發(fā)表在Talanta, org/10.1016/j.talanta.2024.126149和Analytical Chemistry, org/10.1021/acs.analchem.4c01623），本研究進(jìn)一步建立了一種多重免疫層析生物傳感器。該傳感器增強(qiáng)了陽(yáng)性結(jié)果的顯色強(qiáng)度，同時(shí)避免了假陽(yáng)性結(jié)果的干擾，實(shí)現(xiàn)對(duì)痕量血痕的種屬和性別即時(shí)鑒定。

案件現(xiàn)場(chǎng)的生物檢材可提供重要的遺傳學(xué)信息以推動(dòng)案件偵破。然而，由于犯罪嫌疑人對(duì)案件現(xiàn)場(chǎng)的破壞，獲取的生物檢材往往是痕量或降解的。因此，需要從痕量樣本中同時(shí)鑒定多個(gè)靶標(biāo)以獲取盡可能多的生物學(xué)信息。盡管多重環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增結(jié)合免疫層析的方法可進(jìn)行痕量樣本分析，但在多重環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增中，多個(gè)靶標(biāo)共享底物，使得每個(gè)靶標(biāo)的可檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物減少，從而導(dǎo)致免疫層析試紙條上的顯色信號(hào)較弱。此外，該方法無(wú)法防止引物二聚體造成的假陽(yáng)性結(jié)果。

本研究建立了一種多重免疫層析生物傳感器，旨在增強(qiáng)陽(yáng)性結(jié)果的顯色信號(hào)并防止假陽(yáng)性結(jié)果的干擾，以用于準(zhǔn)確的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。通過(guò)使用生物標(biāo)記的核苷酸標(biāo)記擴(kuò)增產(chǎn)物，擴(kuò)增產(chǎn)物可被納米顆粒探針捕獲并在免疫層析試紙上產(chǎn)生比色信號(hào)。由于大量生物標(biāo)記核苷酸的摻入，錨定在擴(kuò)增子上的生物標(biāo)記為納米顆粒探針提供了大量的識(shí)別位點(diǎn)，從而增強(qiáng)了陽(yáng)性結(jié)果的顯色信號(hào)。同時(shí)，由于核苷酸無(wú)法與寡核苷酸結(jié)合，即使引物二聚體存在，其缺乏相應(yīng)的可產(chǎn)生假陽(yáng)性顯色信號(hào)的生物標(biāo)記，從而防止了假陽(yáng)性結(jié)果對(duì)結(jié)果準(zhǔn)確性的干擾。此外，核苷酸作為一種擴(kuò)增底物，在檢測(cè)不同靶標(biāo)時(shí)可以通用，無(wú)需重新合成生物標(biāo)記引物，提高了檢測(cè)靈活性（Sensors and Actuators B: Chemical, org/10.1016/j.snb.2025.138025）。